高中生物知识点

知识点总结

      该知识点主要包括提取DNA的方法、实验设计及操作提示等要点。

      1. 提取DNA的方法:首先要掌握提取生物大分子的基本思路,其次是要掌握DNA提取与鉴定的具体方法。

      当NaCl溶液浓度低于0.14mol/L时,随浓度的升高,DNA的溶解度降低;当NaCl溶液浓度高于0.14mol/L时,随浓度升高,DNA的溶解度升高。此外,DNA不溶于酒精溶液,但是细胞中的某些蛋白质则溶于酒精。利用这一原理,可以将DNA与蛋白质进一步分离。

      蛋白酶能水解蛋白质,但是对DNA没有影响。大多数蛋白质不能忍受60—80oC的高温,而DNA在80oC以上才会变性。洗涤剂能够瓦解细胞膜,但对DNA没有影响。

      在加热条件下,DNA遇二苯胺会生成蓝色,因此,二苯胺可以作为鉴定DNA的试剂。

      2. 实验设计及操作提示:实验的步骤及注意事项是同学们要掌握的关键。

    (1)制备鸡血细胞液时,要在新鲜的鸡血中加入柠檬酸钠的原因:制备鸡血细胞液时,要在新鲜的鸡血中加入抗凝剂——柠檬酸钠,防止血液凝固。其原理是柠檬酸钠能与血浆中Ca2+发生反应,生成柠檬酸钙络合物,血浆中游离的Ca2+大大减少,血液便不会凝固,因为鸡的红细胞,白细胞都有细胞核,DNA主要存在于细胞核中,所以在离心或静置沉淀后,要弃出上清液——血浆。

    (2)提取DNA的第一步是材料的选取,一定要选取DNA含量较高的生物材料,否则会由于实验过程中或多或少的损失而造成检测的困难;第二步是DNA的释放和溶解,这一步是实验成功与否的关键,要尽可能使细胞内的DNA全部溶解;第三步是DNA的纯化,即根据DNA的溶解特性、对酶及高温的耐受性的不同等特性,最大限度地将DNA与杂质分开;最后一步是对DNA进行鉴定,这是对整个实验的结果的检测。

    (3)盛放鸡血细胞液的容器,最好是塑料容器。鸡血细胞破碎以后释放出的DNA,容易被玻璃容器吸附,由于细胞内DNA的含量本来就比较少,再被玻璃容器吸附去一部分,提取到的DNA就会更少。因此,实验过程中最好使用塑料的烧杯和试管,这样可以减少提取过程的DNA的损失。


常见考法

      在平常测试中,该知识点多以选择题的形式出现。通常考查DNA的提取、鉴定方法及操作过程中的注意事项,出题形式灵活,难度不大。从近几年生物高考试题看,全国课标卷到目前还没有涉及到本专题的知识点;在单科生物卷中,涉及到了本部分知识,多以选择题形式出现,因此,记住相关基础知识是关键。


误区提醒

提取、鉴定DNA的方法、不能用哺乳动物成熟红细胞作实验材料的原因、实验操作中两次使用蒸馏水的原因是本专题的易错问题,一定要把握住要点,记清细节知识(如知识点总结),突破相关试题。

【典型例题】

某同学用洋葱进行DNA 粗提取和鉴定实验,操作错误的是(   )

A. 加入洗涤剂后用力进行快速、充分的研磨

B. 用蛋白酶纯化过滤后的研磨液中的 DNA

C. 加入酒精后用玻璃棒轻缓搅拌

D. 加二苯胺试剂摇匀后沸水浴加热

答案:A

解析:加入洗涤剂后研磨动作要轻缓、柔和,否则容易产生大量的泡沫,不利于后续步骤的操作,A错误;利用蛋白酶分解杂质蛋白,从而使提取的DNA与蛋白质分开,起到纯化的作用,B正确;加入酒精溶液,静置溶液中出现的白色丝状物就是粗提取的DNA,用玻璃棒沿一个方向轻缓搅拌,防止断裂,C正确;用二苯胺鉴定DNA需要水浴加热,D正确。